Фенотипические и молекулярно-генетические свойства Microsporum canis

Проведены многолетние исследования (20122018) культур микроскопических грибов (дерматомицетов), выделенных от клинически больных кошек. Отбор проб биоматериала осуществлен от домашних животных с признаками поражения кожи и шерстного покрова в ветеринарных клиниках Республики Казахстан. Молекулярногенетические исследования, видовая идентификация и определение свойств выделенных культур проведены с помощью утвержденных методических рекомендаций и определителей патогенных и условно-патогенных грибов. Изучены культурально-морфологические (фенотипические), кератинолитические, биохимические и молекулярно-генетические свойства основного вида микроскопических грибов, вызывающего дерматомикозы, – Microsporum canis. В результате исследований получены следующие четыре штамма гриба Microsporum canis: 13 Kz, 376 Kz, 384 Kz и 428 Kz. Изученные штаммы характеризовались разнообразием фенотипических свойств (формирование разных по морфологии колоний на питательных средах, разнообразная окраска воздушного и субстратного мицелия), сходством микроструктур (септированный бамбукообразный мицелий с характерным ветвлением, двухслойные веретенообразные макроконидии), биохимических свойств (наличие высокой сахаролитической и уреазной активности) и кератинолитической активностью. Фенотипические характеристики полностью соответствовали культуре микроскопического гриба Microsporum canis. Молекулярногенетические исследования установили идентичность последовательностей полученных штаммов гриба Microsporum canis 13 Kz, 376 Kz, 384 Kz и 428 Kz с опубликованными в GenBank последовательностями штаммов EU181444.1, EF581130.1 и EF581129.1. Молекулярно-генетические исследования позволили идентифицировать полученные культуры дерматомицетов как анаморфную стадию Microsporum canis, а также как стадию телеоморфа (Arthroderma otae).

дерматомицеты, фенотипические свойства, штаммы, воздушный и субстратный м ицелий, макроконидии

1. Weitzman I., McGinnis M.R., Padhye A., Ajello L. The genus Arthroderma and its later synonym Nannizzia. Mycotaxon. 1986. Vol. 25. P. 505–518.

2. Глотова Т.И. Вспышка микроспории у домашних кошек // Ветеринария. 1997. № 11. С. 47–50.

3. Глотова Т.И. Дерматомикозы собак и кошек в условиях города // Ветеринария. 1998. № 1. С. 32–33.

4. Шалаев И.М., Глотова Т.И., Тугунова Т.Б., Лайшев К.А., Глотов А.Г. Особенности распространения и лечения дерматофитозов собак и кошек в условиях Крайнего Севера // Российский ветеринарный журнал. 2007. № 3. С. 6–9.

5. Кухар Е.В., Глотова Т.И., Глотов А.Г. Серологическая диагностика микроспории у собак и кошек // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. 2016. № 4. С. 6–9.

6. Frymus T., Gruffydd-Jones T., Pennisi M.G., Addie D., Belák S., Boucraut-Baralon C., Egberink H., Hartmann K., Hosie M.J., Lloret A., Lutz H., Marsilio F., Möstl K., Radford A.D., Thiry E., Truyen U., Horzinek M.C. Dermatophytosis in cats: ABCD guidelines on prevention and management // Journal of Feline Medicine and Surgery. 2013. Vol. 15(7). Р. 598–604. DOI: 10.1177/1098612X13489222.

7. Kawasaki M., Aoki M., Ishizaki H., Nishimura K., Miyaji M. Phylogeny of Epidermophyton floccosum and other dermatophytes // Mycopathologia. 1996. Vol. 134 (3). P. 121–128. DOI: 10.1007/bf00436718.

8. Graser Y., Kuijpers A.F., El Fari M., Presber W., De Hoog G.S. Molecular and conventional taxonomy of the Microsporum canis complex // Medical Mycology. 2000. Vol. 38. P. 143–153. DOI: 10.1080/mmy.38.2.143.153.

9. Sharma R., Rajak R.C., Pandey A.K., Graser Y. Internal Transcribed Spacer (ITS) of rDNA of appendaged and non-appendaged strains of Microsporum gypseum reveals Microsporum appendiculatum as its synonym // Antonie Van Leeuwenhoek. 2006. Vol. 89 (1). P. 197–202. DOI: 10.1007/s10482-005-9018-x.

10. Jung H.J., Kim S.Y., Jung J.W., Park H.J., Lee Y.W., Choe Y.B., Ahn K.J. Identification of dermatophytes by polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism analysis of metalloproteinase-1 // Ann Dermatol. 2014. Vol. 26 (3). P. 338–342.

11. Kano R., Okabayashi K., Nakamura Y., Ooka S., Kashima M., Mizoguchi M. Differences among chitin synthase 1 gene sequences in Trichophyton rubrum and T. violaceum // Medical Mycology. 2000. Vol. 38 (1). P. 47–50. DOI: 10.1080/mmy.38.1.47.50.

12. Mochizuki T., Tanabe H., Kawasaki M., Ishizaki H., Jackson C.J. Rapid identification of Trichophyton tonsurans by PCR-RFLP analysis of ribosomal DNA regions // Journal of Dermatological Science. 2003. Vol. 32 (1). P. 25–32. DOI: 10.1016/s0923-1811(03)00030-6.

13. Liu D., Coloe S., Baird R., Pedersen J. // Application of PCR to the identification of dermatophyte fungi. Journal of Medical Microbiology. 2000. Vol. 49 (6). P. 493–497. DOI: 10.1099/0022-1317-49-6-493

14. Graser Y., El Fari M., Presber W., Sterry W., Tietz H.J. Identification of common dermatophytes (Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton) using polymerase chain reactions // British Journal of Dermatology. 1998. Vol. 138 (4). P. 576–582. DOI: 10.1046/j.13652133.1998.02165.x.

15. Turin L., Riva F., Galbiati G., Cainelli T. Fast simple and highly sensitive double-rounded polymerase chain reaction assay to detect medically relevant fungi in dermatological specimens // European Journal of Clinical Investigation. 2000. Vol. 30 (6). P. 511–518. DOI: 10.1046/j.1365-2362.2000.00659.x.

16. Sadfi-Zouaoui N., Hannachi I., Rouaissi M., Hajlaoui M.R., Rubio M.B., Monte E., Boudabous A., Hermosa M.R. Biodiversity of Trichoderma strains in Tunisia // Canadian Journal of Microbiology. 2009. Vol. 55 (2). P. 154–162. DOI: 10.1139/w08-101.

17. White T.J., Bruns T., Lee S., Taylor J. Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. In M.A. Innis, D.H. Gelfand, J.J. Sninsky, T.J. White (ed.). PCR protocols: a guide to methods and applications. Academic Press, Inc., New York, 1990. P. 315–322.

18. White T.J., Bruns T., Lee S., Taylor J. Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. In: PCR Protocols: a guide to methods and applications. USA. New York: Academic Press, 1990. 482 p.

19. Werle E., Schneider C., Renner M., Völker M., Fiehn W. Convenient single-step, one tube purification of PCR products for direct sequencing // Nucleic Acids Research. 1994. Vol. 22. P. 4354–4355. DOI: 10.1093/nar/22.20.4354.

20. Korf I., Yandell M., Bedell J. BLAST. O'Reilly Media, 2003. 360 p.

21. Kumar S., Tamura K., Nei M. MEGA3: Integrated software for Molecular Evolutionary Genetics Analysis and sequence alignment // Briefings in bioinformatics. 2004. Vol. 5. P. 150–163.

22. Clayton R.A., Sutton G., Hinkle P. S., Bult Jr.C., Fields C. Intraspecific variation in small-subunit rRNA sequences in GenBank: why single sequences may not adequately represent prokaryotic taxa // International Journal of Systematic Bacteriology. 1995. Vol. 45. P. 595–599. DOI: 10.1099/00207713-45-3-595.